L'obiettivo principale di questa Core Facility è quello di fornire l'attrezzatura e la competenza in microscopia e tomografia elettronica.

Metodologie

  • Microscopia elettronica su campioni inclusi in resina epossidica
  • Analisi stereologica di immagini acqusite al microscopio elettronico
  • Rapid freezing-cryosustitution (metodologia che consente di fissare I campioni prevenendo la formazione di artefatti)
  • Ricostruzione tridimensionale e costruzione di modelli di strutture cellulari partendo da sezioni seriali
  • Ricostruzione tridimensionale e costruzione di modelli di strutture cellulari usando la tomografia elettronica
  • Immuno marcatatura di proteine e lipidi su criosezioni per microscopia elettronica
  • Immuno marcatura di proteine e lipidi su sezioni di resina epossidica dopo pre-embedding e gold enhancement di particelle di nano gold.
  • Immuno marcatura di proteine e lipidi su sezioni di resina epossidica dopo amplificazione del segnale con immunoperossidasi e pre-embedding
  • Microscopia correlativa (fluorescenza ed elettronica), con la possibilità di analizzare quattro diversi markers (due in fluorescenza e due in microscopia elettronica)
  • Microscopia correlativa (video florescenza ed elettronica): analisi di cellule in vivo con identificazione della stessa cellula e dello stesso organello combinato con la microscopia elettronica la ricostruzione 3D e la tomografia elettronica.

Prospettive future

  • Acquisto di un dispositivo di scansione per il microscopio elettronico Tecnai 12 Biotwin (FEI7Philips) per l’analisi di complessi proteici
  • Messa a punto di sistemi per la ricostruzione tridimensionale di organelli cellulari e complessi molecolari basati sulla tomografia elettronica a scansione e trasmissione
  • Messa a punto di metodologie di marcatura con immunoperossidasi su sezioni di resina epossidica dopo rapid freezing-cryosubstitution su cellule trasfettate con proteine legate a horseradish peroxidase

Strumentazioni

  • Microscopio elettronico a trasmissione (Zeiss 109)
  • Microscopio elettronico a trasmissione (Tecnai 12 Biotwin) con goniometro motorizzato
  • Cryo-ultramicrotomo (Leica)
  • Ultramicrotomo (Leica)
  • Ultramicrotomo (Leica LKB-Nova)